北大生命科学学院刘东课题组应用CRISPR-Cas9基因组编辑(genome editing)技术,在模式生物线虫中成功实现了不同类型的基因打靶:1、在性腺特异表达Cas9的转基因线虫中,通过饲喂基因靶点特异的gRNA或直接向线虫性腺注射Cas9和gRNA(DNA或RNA),均获得了可遗传的突变体;2、在非性腺表达Cas9的转基因线虫中,通过饲喂基因特异的gRNA获得了体细胞突变体;3、利用热激蛋白基因启动子驱动的转Cas9基因线虫,该饲喂CRISPR-Cas9系统实现了不同发育时期的体细胞基因突变。饲喂CRISPR-Cas9系统可省时、高效地实现大规模特定基因定向敲除和突变体筛选,有潜力成为线虫反向遗传学研究的新型工具。本研究相关论文“Heritable/Conditional Genome Editing in C. elegans Using a CRISPR-Cas9 Feeding System”近日已在线发表在《细胞研究》杂志上。
建立线虫CRISPER-CAS9饲喂系统并成功获得突变体和组织特异性基因敲除个体
该研究成果有力推动了刘东实验室“基因间区长非编码RNA的筛选和功能分析”课题的进展,部分延续了前期非编码RNA的工作(Liu et al., 2011. Cell Res. 21:1605-1618,刘东与樊启昶老师共同指导完成)。博士研究生刘朋朋、隆例江和熊锴为该研究论文的共同第一作者,刘东为通讯作者。本研究得到生物膜和膜生物工程国家重点实验室、国家自然科学基金委、科技部和北京大学-清华大学生命联合中心的资助。
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